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大豆皂苷对照品应用和测定步骤
点击次数:122 发布时间:2017-12-22
大豆皂苷对照品是大豆中的一种生理活性成分,广泛应用于医药行业中。传统的方法往往采取甲醇作为溶剂进行提取,其具有毒性。本研究使用无毒的食用乙醇和水作为大豆皂苷对照品的提取剂,利用正交试验得到zui佳提取条件,结果显示食用乙醇的提取率要高于水提取;食用乙醇提取大豆皂苷对照品的zui适条件为:食用乙醇浓度为70%,提取温度控制在80℃,提取4h,固液比是1/18(W/W),收集2次提取后的滤液。
 
大豆皂苷对照品测定步骤
(1)样品处理:
样品1:为豆粕乙醇提取物经大孔树脂吸附法纯化的大豆皂苷对照品制得物,棕黄色粉末。
样品2:为豆粕乙醇提取物经正丁醇再分配法纯化制得的大豆皂苷对照品提取物,黄色粉末。
样品3:为将样品2按样品1的方法时一步纯化处理的大豆皂苷对照品制得物,为浅黄色片状结晶。
(2)标准曲线的绘制:准确吸取齐墩果酸标准溶液于具塞试管中,水浴上蒸干,于每个试管中加新配制的香草醛,流水冷却,加冰醋酸,摇匀,以分光光度计测量吸光度值A,绘制标准曲线图并将结果做统计分析得到回归方程。
(3)样品中大豆皂苷对照品含量的测定:
a. 样品的薄层色谱分析:把提取的样品溶液,大豆皂苷的90%醇提取物的甲醇溶液及剂墩果酸标准液点于CMC-硅胶G薄层板上,进行分析。
b. 大豆皂苷对照品与剂墩果酸量比换算系数的推算:
样品的测定:吸取300μL样品1,样品2和样品3溶液,测得A值,每个样品各取3份测定。
(4)精密度试验:连续测定剂墩果酸标准品溶液200μL,方法同上,共5次,得出相对标准差。
(5)回收率试验:准确吸取样品1溶液200μL于3只具塞试管上,加入准确吸取的齐墩果酸标准溶液100μL。
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